Edu染色(细胞增殖检测)
5-乙炔基-2‘-脱氧尿苷(EdU)染色是一种基于点击化学(Click Chemistry)的细胞增殖检测方法。EdU作为胸苷类似物,可在细胞S期(DNA合成期)掺入新合成的DNA链中,通过与荧光标记的叠氮化物(如Alexa Fluor® 488/594)发生高效、特异的共价反应,实现对增殖细胞的快速检测。
5-乙炔基-2‘-脱氧尿苷(EdU)染色是一种基于点击化学(Click Chemistry)的细胞增殖检测方法。EdU作为胸苷类似物,可在细胞S期(DNA合成期)掺入新合成的DNA链中,通过与荧光标记的叠氮化物(如Alexa Fluor® 488/594)发生高效、特异的共价反应,实现对增殖细胞的快速检测。
5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色是一种基于点击化学(Click Chemistry)的细胞增殖检测方法。EdU作为胸苷类似物,可在细胞S期(DNA合成期)掺入新合成的DNA链中,通过与荧光标记的叠氮化物(如Alexa Fluor® 488/594)发生高效、特异的共价反应,实现对增殖细胞的快速检测。
与传统BrdU染色的对比优势:
无需DNA变性:避免HCl或DNase处理,保留样本完整性。
操作更简便:反应时间短(30分钟~1小时),流程更稳定。
兼容性更强:适合多重染色(如与Hoechst、Ki67、凋亡标记共标)。
体外实验:贴壁细胞、悬浮细胞、类器官、3D细胞球。
体内实验:组织切片(如肿瘤、肠上皮、脑组织等),需提前进行EdU注射(小鼠/大鼠)。
EdU标记
体外:细胞与EdU(终浓度10–50 μM)孵育1–24小时(依增殖速率优化)。
体内:动物腹腔注射EdU(20–50 mg/kg),2–24小时后取材。
样本固定与透化
4%多聚甲醛固定 → 0.5% Triton X-100透化。
点击化学反应
加入含荧光叠氮化物的反应液(如EdU-Alexa Fluor 594),避光孵育30分钟。
检测与分析
荧光显微镜:直接观察增殖细胞(红色/绿色荧光)。
流式细胞术:定量分析S期细胞比例。
高通量筛查:微孔板检测(适用于药物筛选)。
高分辨率荧光图像、增殖细胞百分比统计、组织定位分析报告。
高灵敏度:低浓度EdU即可实现清晰标记,适合低增殖活性细胞。
保留样本结构:无需DNA变性,减少细胞/组织损伤。
快速高效:全程2–3小时完成,适合大批量样本。
多重标记:可与DAPI、凋亡探针(Annexin V)、免疫荧光(如PCNA)联用。
癌症研究:评估肿瘤细胞增殖及药物抑制效果(如化疗药、靶向治疗)。
干细胞与再生医学:追踪干细胞分裂与分化动态。
发育生物学:胚胎或器官发育中的细胞增殖图谱构建。
毒理学研究:检测环境毒素或辐射对细胞增殖的影响。
样本要求:
细胞建议处于对数生长期(汇合度60–80%)。
组织样本需新鲜固定,避免反复冻融。
实验周期:体外实验1–3天,体内实验需额外安排动物处理时间。
注意事项:
EdU可能轻微抑制细胞周期,需优化标记时间。
避免点击反应液长时间暴露于光线下。
EdU/BrdU双标记:同步检测新旧DNA合成。
3D成像分析:类器官或组织切片的Z-Stack重建。
全自动定量:AI图像分析(如肿瘤增殖热点定位)。
注:可根据客户需求定制方案,以上信息仅供参考。
上海睿远生物医药科技有限公司
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