产品名称 | 九色多重免疫荧光试剂盒Plus版(兔鼠通用二抗) |
---|
存储方式 | 4℃保存,一年有效期。 |
---|
使用方法 | 试剂盒组分请参考说明书里面组分保存要求,详细操作步骤请参考说明书。 |
---|
注意事项 | 一抗选择注意事项: 1、如样本是石蜡切片或冰冻切片,应选择适用于IHC的一抗; 2、如样本是细胞爬片,应选择适用于ICC/IF的一抗。 |
---|
酪酰胺信号放大(TSA ,Tyramide signal amplification)技术是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶 蛋白进行标记的酶学检测方法,类似常规免疫组化的 DAB 显色方法 ,TSA 技术同样采用 HRP 标记的二 抗,同样有对应的“显色 ”步骤(HRP 催化加入反应体系的酪胺荧光素底物,产生活化荧光底物,活化底 物可与抗原上的酪氨酸等残基共价结合,使样品上稳定的共价结合酪胺荧光素。之后用热修复法或者抗体洗脱液洗去非共价结合的一抗-二抗-HRP 复合物,重复下一种一抗-hrp 二抗来第二轮孵育,换另一种酪胺荧 光素底物,如此往复就可实现多重标记。 TSA 详细原理是利用酪胺 Tyramide 的过氧化物酶反应(酪胺盐在 HRP 催化 H202 下形成共价键结合位 点) ,产生大量的酶促产物,该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基)结合,这样在 抗原-抗体结合部位就有大量的荧光素沉积,结果使其检测信号得到 10- 100 倍增强。简单来说,用这种方法 做多重免疫荧光是利用二抗上带有的 HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧 光素。荧光素在 HRP 和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧 光素稳定结合。然后微波或煮沸或者水浴等热修复处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧 光素稳定共价结合在样本切片蛋白上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧 光素都结合好后,最后去检测结果。 由于每次体系中都只有单一抗体孵育,因此无需担心抗体交叉反应, 以及一抗二抗种属匹配问题,大大减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。也就是说,如果用 TSA 技术,同一张片子上所有的靶标都可以选用特异性高的兔单克隆抗体。搭配同一支抗兔的 HRP 二抗就可以 进行实验,而且信号放大的倍数大大增强。本公司开发的试剂盒具体酪胺荧光染料为以下其中一种或者多 种:TYR-480Plus ,TYR-520Plus ,TYR-570Plus ,TYR-620Plus ,TYR-700Plus ,TYR-780Plus、TYR-650Plus、TYR-540Plus。此试剂盒中的荧光染料可单独或配合使用。可以实现单标、双标、三标以及更多重荧光放大/多重同源抗体荧光标记等功能,极大丰富了此试剂盒的内涵。
试剂盒组分:
|
|
|
|
名称 | 货号 | 规格 | 保存条件 |
TYR-480 Plus 荧光染料 | RC006 | 浓缩型,50ul ,200x | 4℃ |
TYR-520 Plus 荧光染料 | RC001 | 浓缩型,50ul ,200x | 4℃ |
TYR-570Plus 荧光染料 | RC002 | 浓缩型,50ul ,200x | 4℃ |
TYR-620Plus 荧光染料 | RC003 | 浓缩型,50ul ,200x | 4℃ |
TYR-700Plus 荧光染料 | RC007 | 浓缩型,50ul ,200x | 4℃ |
TYR-780Plus 荧光染料 | RC005 | 浓缩型,50ul ,200x | 4℃ |
TYR-650Plus 荧光染料 | RC008 | 浓缩型,50ul ,200x | 4℃ |
TYR-540Plus 荧光染料 | RC009 | 浓缩型,50ul ,200x | 4℃ |
TSA buffer | RCB0086 | 48mL | 4℃ |
HRP 山羊抗兔/鼠通用二抗 | RCB054 | 40mL | 4℃ |
Dapi 染液(即用型) | RC05 | 10mL | 4℃ |
抗体稀释液 | RCT002 | 80mL | 4℃ |
3%过氧化氢 | RC012 | 80mL | 4℃ |
|
|
|
|
试剂盒使用简要流程:(详细操作步骤请参见技术文档——多重免疫荧光实验流程):
上海睿远生物医药科技有限公司
电话:19946275258
Email: 498878287@qq.com
官方网址:www.fulaibio.com